Amfotericín B polyén protiplesňové lieky sú rozhodujúce v boji proti závažným plesňovým infekciám. Ako dodávateľ polyénových liekov amfotericínu B som dobre, orientovaný v zložitom výrobnom procese týchto liekov na záchranu života. V tomto blogu sa ponorím do kroku - krok o krok, ako sa vyrábajú polyénové lieky amfotericín B polyénové antifungálne lieky.
1. Výber a kultivácia mikroorganizmu
Produkcia amfotericínu B sa začína výberom vhodného mikroorganizmu. Streptomyces nodosus je primárnym zdrojom amfotericínu B. Tento aktinomycete má jedinečnú genetickú schopnosť syntetizovať túto polyénovú antifungálnu zlúčeninu.
Získame čisté kultúry Streptomyces nodosus zo spoľahlivých zbierok kultúry. Tieto kultúry sa potom starostlivo udržiavajú v prísnych laboratórnych podmienkach, aby sa zabezpečila ich životaschopnosť a produktivita. Počiatočným krokom je pestovanie mikroorganizmu v semennom kultivačnom médiu. Toto médium je formulované tak, aby poskytovalo všetky základné živiny, ako sú napríklad uhlíkové zdroje (zvyčajne glukóza), zdroje dusíka (napríklad peptón) a rôzne minerály potrebné na rast baktérií.
Kultúra semien sa inkubuje pri optimálnej teplote, zvyčajne okolo 28 - 30 ° C, so správnou prevzdušňovaním a miešaním. To pomáha baktériám množiť sa a dosiahnuť dostatočnú hustotu buniek. Akonáhle kultúra semien dosiahne požadovanú fázu rastu, prenesie sa do väčšej fermentačnej nádrže.
2. Proces fermentácie
Proces fermentácie je srdcom produkcie amfotericínu B. Fermentačná nádrž, známa tiež ako bioreaktor, je veľká nádoba z nehrdzavejúcej ocele, ktorá dokáže držať tisíce litrov fermentačného média.
Fermentačné médium je komplexná zmes navrhnutá na podporu rastu Streptomyces nodosus a stimuluje produkciu amfotericínu B. Obsahuje špecifické živiny, rastové faktory a prekurzory, ktoré sú potrebné pre biosyntézu antifungálnej zlúčeniny. Zloženie média je starostlivo optimalizované prostredníctvom rozsiahleho výskumu a vývoja, aby sa dosiahol najvyšší možný výťažok amfotericínu B.
Počas fermentácie sa presne kontrolujú podmienky prostredia, ako je teplota, pH, rozpustený kyslík a rýchlosť miešania. Teplota sa udržiava na približne 28 - 30 ° C, pretože ide o optimálny rozsah rastu a metabolizmu Streptomyces nodosus. PH média je udržiavané v úzkom rozsahu, zvyčajne medzi 6,5 - 7,5, aby sa zabezpečilo správne fungovanie enzýmov zapojených do syntézy amfotericínu B.
Počas fermentácie je rozhodujúce prevzdušnenie, pretože Streptomyces nodosus je aeróbna baktéria, čo znamená, že vyžaduje kyslík na rast a metabolizmus. Komprimovaný vzduch je rozbalený do fermentačnej nádrže, aby sa udržala hladina rozpusteného kyslíka na primeranej úrovni. Agitácia je tiež potrebná na zabezpečenie rovnomernej distribúcie živín, kyslíka a baktérií v celom médiu.
Proces fermentácie zvyčajne trvá niekoľko dní, zvyčajne okolo 5 - 7 dní. Počas tejto doby baktérie rastú a produkujú amfotericín B, ktorý sa hromadí vo fermentačnom vývaru.
3. Extrakcia amfotericínu B
Po dokončení fermentácie je ďalším krokom extrahovanie amfotericínu B z fermentačného vývaru. Vývar obsahuje komplexnú zmes buniek, živín a iných metabolitov, takže na izoláciu cieľovej zlúčeniny je potrebná séria extrakčných krokov.
Prvým krokom je oddelenie buniek od vývaru. Zvyčajne sa to robí filtráciou alebo odstredením. Bunky sa odstránia a číry vývar sa zhromažďuje na ďalšie spracovanie.
Amfotericín B sa potom extrahuje z vývaru pomocou organických rozpúšťadiel. Bežne používané rozpúšťadlá zahŕňajú metanol, etanol a chloroform. Proces extrakcie je založený na princípe rozpustnosti. Amfotericín B je rozpustnejší v organickom rozpúšťadle ako vo vodnom vývaru, takže sa rozdeľuje do organickej fázy.
Po extrakcii je organická fáza oddelená od vodnej fázy. Organické rozpúšťadlo sa potom odstráni odparovaním za zníženého tlaku, aby sa získal surové extrakt z amfotericínu B.
4. Čistenie amfotericínu B
Surový extrakt amfotericínu B obsahuje nečistoty, ako sú iné metabolity produkované baktériami, zvyškovými živiny a zvyšky rozpúšťadla. Čistenie je nevyhnutné na získanie produktu s vysokou čistotou, ktorý spĺňa prísne normy kvality pre farmaceutické použitie.
Jednou z najbežnejšie používaných metód purifikácie je chromatografia. Existujú rôzne typy techník chromatografie, ktoré sa môžu použiť, ako napríklad chromatografia v stĺpci, iónová chromatografia a vysoko výkonná kvapalinová chromatografia (HPLC).
Columová chromatografia používa stacionárnu fázu (zvyčajne živicu) a mobilnú fázu (rozpúšťadlo). Surový extrakt sa naloží na stĺpec a rôzne komponenty v extrakte interagujú so stacionárnou fázou v rôznych rozsahoch. Keď mobilná fáza prechádza stĺpcom, komponenty sú oddelené na základe ich afinity k stacionárnej fáze. Amfotericín B sa eluuje zo stĺpca v konkrétnom čase a vyčistená frakcia sa zhromažďuje.
Iónová - výmenná chromatografia sa môže použiť na oddelenie amfotericínu B na základe jeho vlastností náboja. Stacionárna fáza v iónovej výmennej chromatografii obsahuje nabité skupiny, ktoré môžu interagovať s nabitými skupinami na molekulách amfotericínu B. Úpravou pH a iónovej pevnosti mobilnej fázy sa amfotericín B môže selektívne eluovať zo stĺpca.
HPLC je pokročilejšia a presnejšia technika čistenia. Používa vysoko tlakové čerpadlo na vynútenie mobilnej fázy cez stĺpec naplnený veľmi jemnou stacionárnou fázou. To umožňuje veľmi vysoké rozlíšenie oddelenia komponentov v surovom extrakte.
Po čistení sa čistota amfotericínu B analyzuje pomocou rôznych analytických techník, ako je HPLC, hmotnostná spektrometria a jadrová magnetická rezonancia (NMR). Produkt musí spĺňať požiadavky na čistotu stanovené regulačnými agentúrami, zvyčajne čistota viac ako 95%.
5. Formulácia a balenie
Akonáhle je amfotericín B purifikovaný, je formulovaný do vhodnej dávkovej formy. Amfotericín B je bežne formulovaný ako injekčný roztok alebo lipozomálna formulácia.
Pre injekčný roztok sa amfotericín B rozpustí vo vhodnom rozpúšťadlom systéme spolu s ďalšími pomocnými látkami, ako sú tlmivé roztoky, stabilizátory a konzervačné látky. Formulácia je starostlivo navrhnutá tak, aby zabezpečila stabilitu a účinnosť lieku.
Lipozomálne formulácie amfotericínu B získali v posledných rokoch popularitu. Lipozómy sú malé lipidové vezikuly, ktoré môžu enkapsulovať amfotericín B. Táto formulácia má niekoľko výhod, vrátane zníženej toxicity a zlepšeného zacielenia na infikované bunky.
Po formulácii sa liek naplní do vhodných nádob, ako sú injekčné liekovky alebo ampulky. Kontajnery sú potom zapečatené a označené všetkými potrebnými informáciami, ako je názov lieku, dávkovanie, dátum exspirácie a podmienky ukladania.
Náš sortiment a výhody
Ako dodávateľAmfotericín B polyénové antifungálne lieky, sme odhodlaní poskytovať výrobky vysokej kvality. Náš výrobný proces dodržiava prísne štandardy kontroly kvality v každom kroku, od mikroorganizmu po konečné balenie.
Okrem polyénových liekov amfotericínu B ponúkame aj ďalšie farmaceutické výrobky, ako napríkladAntifungálne produkty Rezafungin APIaInhibítory vápnika rosuvastatínu regulujú vysoké esterové lipidy. Tieto výrobky sa vyrábajú aj pomocou štátu - z - umeleckých technológií a vysoko kvalitných surovín.
Kontakt pre nákup a vyjednávanie
Ak máte záujem o naše polyénové lieky na amfotericín B alebo iné farmaceutické výrobky, vítame vás, aby ste nás kontaktovali kvôli nákupu a rokovania. Náš tím odborníkov je pripravený poskytnúť vám podrobné informácie o produkte, ceny a technickú podporu.
Odkazy
- Rinehart, KL, & Shield, LS (1962). Amfotericín B, nové protiplesňové antibiotikum. I. Produkcia, izolácia a charakterizácia. Antibiotiká ročne, 10, 473 - 480.
- Vandamme, EJ (1992). Biotechnológia antibiotík. New York: Marcel Dekker.
- Walsh, TJ a Dixon, DM (2018). Lipidové formulácie amfotericínu B: klinická farmakológia, účinnosť a bezpečnosť. Expert Review of Clinical Pharmacology, 11 (6), 569 - 581.